Estrazione, analisi qualitativa e quantitativa del DNA

Riassunto

Per il buon esito di qualunque analisi di biologia molecolare occorre necessariamente una buona preparazione di DNA genomico. L’estrazione del DNA dal campione biologico repertato è però probabilmente una delle fasi più delicate in genetica forense. Durante la fase estrattiva infatti il campione di DNA è più suscettibile di contaminazione da parte di DNA esogeno rispetto a tutti i passaggi successivi di processamento; per questo motivo molti laboratori preferiscono analizzare il campione in tempi e talvolta luoghi differenti rispetto al materiale di riferimento. L’estrazione del DNA oggetto di indagine consiste nella purificazione del materiale genetico da tutte quelle sostanze superflue contenute nel campione da analizzare che potrebbero costituire un ostacolo nelle fasi successive di processamento. Tra i possibili contaminanti si possono annoverare le proteine che impaccano e proteggono il DNA nella cellula, l’RNA, enzimi quali le DNasi, che potrebbero portare alla frammentazione del materiale genetico rendendolo così inutilizzabile, i sali, i residui organici, i detergenti, le tinture, ecc. (Tabella 6.1 nel Capitolo 6). In genetica forense in particular modo, il problema della contaminazione rappresenta una costante dovuta alle caratteristiche del materiale repertato, spesso sporco e di varia natura. In aggiunta, la scarsa disponibilità di DNA da sottoporre ad analisi e la sua possibile provenienza da parte di più soggetti costituiscono le maggiori problematiche.