Komponenten der Peroxisomen pflanzlicher Zellen

Zusammenfassung

An Saccharose-Dichtegradienten isolierte Peroxisomen pflanzlicher Zellen sind in hypotonischem Medium nicht stabil (Gerhardt und Beevers 1970, Tolbert 1971 a, c)¹. Diese Eigenschaft der Organellen bildet allgemein die Basis für die Isolierung von Peroxisomenmembranen (Bieglmayer et al. 1973, Huang und Beevers 1973, Brown et al. 1974, Ludwig und Kindl 1976). Die isolierten Peroxisomen werden osmotisch aufgebrochen und liefern nach Zentrifugation (ca. 50 000 × g, 30 Min.) zwei Fraktionen: die lösliche oder „Matrix“-Fraktion und eine partikuläre Fraktion, die die Membranen enthält („Membran“-Fraktion). Die ungereinigte Membranfraktion kann durch nicht aufgebrochene Organellen (Gerhardt und Beevers 1970) und bis zu 50% durch lösliche Proteine (Bieglmayer et al. 1973) verunreinigt sein. Die Fraktion wird daher durch Zentrifugation an einem Saccharose-Dichtegradienten gereinigt (Bieglmayer et al. 1973). — Latenzuntersuchungen an der membrangebundenen Malatsynthetase der Glyoxysomen des Ricinus-Endosperms ergaben (Kap. 7.4.), daß die Membran der Glyoxysomen beim osmotischen Aufbrechen der Organellen nicht umgestülpt wird, d. h. ihre Innenseite nicht zur Außenseite wird (Bieglmayer et al. 1974).