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Emissionsfilterung

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Konfokale Mikroskopie in Weiß
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Zusammenfassung

Ein Strahlteiler zerteilt den gesamten Lichtfluss in einzelne, separate Anteile, die dann auch für sich weiter bearbeitet werden können. Ein dispersives Element gibt den verschiedenen Farben zwar unterschiedliche Richtungen, aber das Licht ist immer noch in einem zusammenhängenden Spektrum verbunden. Um die einzelnen Anteile zu extrahieren, muss das gesamte Spektrum nach der Dispersion noch unterteilt werden. Dazu gibt es prinzipiell zwei Möglichkeiten: Zum einen kann man eine Serie von Sensoren in einer Reihe anordnen und auf diese Reihe das Spektrum abbilden. Andererseits lässt sich aber auch ein Detektorsystem mit variablen Segmenten aufbauen, und tatsächlich war der Multiband-Fluoreszenzdetektor auch das erste Verfahren zur spektralen Bildaufnahme in der konfokalen Mikroskopie. Daneben hat dieses Element noch die Aufgabe, letztmalig Hand an die Trennung der Fluoreszenzemissionen zu legen. Bei einem Zeilendetektor ist das nur rechnerisch möglich, da die Kanäle eines solchen Detektors nur gleichmäßig aufgeteilte Emissionen darstellen und nicht die einzelnen Fluoreszenzfarbstoffe getrennt werden können. Ein Multibanddetektor lässt sich hingegen physikalisch weiter so modifizieren, dass das Ergebnis sofort einzelne Fluoreszenzemissionen wiedergibt. Freilich kann man dann bei Bedarf noch beliebige Algorithmen auf die solcherart gemessenen Signale anwenden. Eine bestmögliche Trennung am Eingang dieser Algorithmen ist aber immer die bessere Ausgangssituation.

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Literatur

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Borlinghaus, R.T. (2016). Emissionsfilterung. In: Konfokale Mikroskopie in Weiß. Springer Spektrum, Berlin, Heidelberg. https://doi.org/10.1007/978-3-662-49359-5_8

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