Wilder’s Retikulinversilberung

Zusammenfassung

Nach Snodgress et al. [1] läßt sich die Retikulinversilberung von Wilder für Harzschnitte auch von osmiertem Material adaptieren. Epoxiharze werden durch Kalilauge-Methanol von den Schnitten entfernt, und Osmium wird durch Wasserstoffperoxidbehandlung beseitigt (s. §8). So vorbereitet sind die Schnitte, die etwas dicker als gewöhnlich sein sollen (2–3 μm dick), für die Versilberung bereit:

Methode zur Versilberung von Retikulin

• 1 Vorbehandlung: Entfernen des Harzes mit Kalilauge-Methanol. Entfernen des Osmiums mit Wasserstoffperoxid (s. §8).

• 2 Oxidation: 0,5% wäßrige Perjodsäure 10 min

• 3 Spülen in Aqua dest. 3×5 min

• 4 Sensibilisieren in 1 % wäßriger Uranymitratlösung 1 min

• 5 Kurzes Spülen in Aqua dest. 10 s

• 6 Silberlösung: Schnitte einzeln einstellen 1–2 min

• 7 Kurzes Spülen in 95 % Äthanol 5 s

• 8 Reduktionslösung: am besten nur für einen Objektträger verwenden, dann erneuern 1 min

• 9 Spülen in Aqua dest. 3×5 min

• 10 Tonen in gelber Goldchloridlösung 1–2 min

• 11 Spülen in Aqua dest. 3×5 min

• 12 Fixieren: in 1 % Natriumthiosulfat in 30% Äthanol 1 min

• 13 Spülen in 30% Äthanol, 3ö5 min

• 14 Entwässern in der Alkoholreihe und Eindecken der Schnitte.