Kriterien für die erfolgreiche Zusammensetzung und die genetische Stabilität der übertragenen Genkonstrukte

Zusammenfassung

Nach Anwendung einer der im Kapitel 4 beschriebenen Methoden zum Transfer von Fremd-DNA in pflanzliche Zellen wird in der Regel auf molekularbiologische Weise versucht nachzuweisen, ob und in wieviel Kopien die Fremd-DNA in das pflanzliche Genom inseriert und integriert worden ist. Von ebenso großem Interesse ist natürlich, ob und mit welcher Rate die eingebrachte Fremd-DNA exprimiert wird (Benfey und Chua, 1989). Da eine recht große Zahl von transgenen Pflanzen eine durchaus mindere Expressionsrate aufweist (Peach und Veiten, 1991), kann nicht ausgeschlossen werden, dass die tatsächliche Rate erfolgreicher Transfer-Vorgänge von Fremd-DNA höher liegt als angenommen und viele Transformanten aufgrund der nicht-nachweisbaren Expression der eingeführten Fremd-DNA unentdeckt bleiben. Die Minderung der Expressionsrate (oder das vollständige Fehlen von Gen-Expression) ist grundsätzlich auf den Insertionsort der Fremd-DNA in dem pflanzlichen Genom zurückzuführen und nicht auf die Fremd-DNA selbst. Belege dafür haben Al-Shawi und Mitarbeiter bereits im Jahr 1990 in einem zweiteiligen Transformationsexperiment (allerdings mit Mäusen) beigebracht: Ein transferiertes Gen, dessen Expressionsrate bestimmt worden war, wurde re-isoliert, erneut transferiert und wiederum seine Expressionsrate bestimmt. Die beiden Expressionsraten waren signifikant verschieden.