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ATP-Spaltung und Aminaufnahme durch Milznervengranula

  • A. Burger
  • A. Philippu
  • H. J. Schümann
Chapter

Zusammenfassung

  1. 1.

    Aus postganglionären sympathischen Rindermilznerven wurde durch Gradientenzentrifugation eine spezifische Granulafraktion (III) gewonnen, die 843 ± 149 ng Noradrenalin/mg Protein enthielt. In dieser Fraktion war die Aktivität des mitochondrialen Enzyms Fumarase an der Grenze der Nachweisbarkeit.

     
  2. 2.

    Nach Inkubation mit 5 · 10−5 M Noradrenalin, 2, 5 mM Mg++ und 5 mM ATP war der Amingehalt der Granula ungefähr doppelt so hoch wie nach Inkubation mit Noradrenalin allein. Dagegen beeinflußten 2, 5 mM Ca++ und 5 mM ATP den Noradrenalingehalt nicht.

     
  3. 3.

    Die Milznervengranulafraktion enthält ATP-spaltende Aktivität, die durch Mg++ K m = 1, 92 mM) und Ca++ K m = 1, 93 mM) in gleichem Ausmaß gesteigert wird. Kombinierte Zugabe beider Ionen wirkt additiv aktivierend auf die ATP-Spaltung. Die ATPase wird in Anwesenheit von Mg++ durch Na++ und K++ nicht stimuliert und durch 10−4 M g-Strophanthin nicht gehemmt.

     
  4. 4.

    Die ATPase einer unspezifischen, noradrenalinarmen Fraktion (I) aus Milznerven war durch Ca++ stärker (K m = 1, 09 mM) als durch Mg++ K m = 3, 00 mM) aktivierbar und hatte eine größere maximale Reaktionsgeschwindigkeit als die ATPase der Fraktion III.

     
  5. 5.

    6 · 10−5 M Reserpin bzw. Prenylamin hemmten die Noradrenalinaufnahme und die ATP-Spaltung. 1, 8 · 10−4 M N-äthylmaleimid hatte auf beide Prozesse keinen Einfluß.

     
  6. 6.

    Eine kausale Beziehung zwischen Amintransport und ATPase-Aktivität in Milznervengranula wird diskutiert.

     

Schlüsselwörter

Milznervengranula Noradrenalinaufnahme ATPase Reserpin Prenylamin NEM 

Summary

  1. 1.

    Homogenates of splenic sympathetic nerves from cattle were used to prepare, by density gradient centrifugation, a specific granule fraction (III), which contains 843 ± 149 ng noradrenaline/mg protein. This fraction did not show any appreciable fumarase activity.

     
  2. 2.

    Incubation of the granule fraction in the presence of noradrenaline (5 × 10−5M) resulted in a nearly doubled noradrenaline content if Mg++ (2.5 mM) and ATP (5 mM) were added. The addition of Ca++ (2.5 mM) and ATP (5 mM), on the contrary, did not increase the noradrenaline content of the granules.

     
  3. 3.

    The ATPase activity of nerve granules can be stimulated to the same degree by Mg++ K m = 1.92) and Ca++ K m = 1.93 mM). A combination of both cations additively activated the hydrolysis of ATP. In the presence of Mg++ this ATPase is neither stimulated by Na++ (30 mM) and K++ (20 mM) nor inhibited by ouabain (10−4 M).

     
  4. 4.

    The ATPase activity of an unspecific fraction (I) obtained from splenic nerve homogenates could be stimulated to a greater extent by Ca++ K m = 1.09 mM) than by Mg++ K m = 3.00 mM). The ATPase of fraction I showed a maximal velocity of reaction higher than that that of fraction III.

     
  5. 5.

    The uptake of noradrenaline and the hydrolysis of ATP were inhibited by 6 × 10−5M reserpine or prenylamine. N-ethylmaleimide (1.8 × 10−4M) did not influence either reactions.

     
  6. 6.

    A causal relationship between amine transport and ATPase activity in the noradrenaline storing nerve granules is discussed.

     

Key-Words

Splenic Nerves Storage Granules Noradrenaline Uptake ATPase Reserpine Prenylamine NEM 

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Copyright information

© Springer-Verlag Berlin Heidelberg 1969

Authors and Affiliations

  • A. Burger
    • 1
  • A. Philippu
    • 1
  • H. J. Schümann
    • 1
  1. 1.Pharmakol. Institut Klinikum EssenRuhr-Universität BochumEssenDeutschland

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