Advertisement

Solid-phase-Radioimmunassay und Blutspiegel von Staphylokokken-α-Toxin

  • E. Habermann
  • K. O. Räker
  • G. Zeuner
Chapter

Zusammenfassung

  1. 1.

    Es wird ein „solid-phase-radioimmunassay“ unter Verwendung von kovalent an Cellulose gebundenen Antikörpern entwickelt. Vorteile und Reaktionsbedingungen werden am Beispiel des Staphylokokken-α-Toxins dargestellt.

     
  2. 2.

    Einige der untersuchten Kaninchenseren, Humanplasma und vor allem natives antitoxisches Serum enthalten präcipitierende Antikörper, welche von der zugesetzten Radioaktivität um so mehr binden, je höher die Konzentration an unmarkiertem Toxin ist („inverser“ Radioimmunassay).

     
  3. 3.

    Unmarkiertes und markiertes Toxin verschwinden ungewöhnlich schnell (Halbwertszeit < 5 min) aus dem zirkulierenden Blut des Kaninchens. Eliminiertes markiertes Toxin läßt sich durch Gabe von Antitoxin nicht in die Blutbahn zurückholen. Vorherige Applikation von Normal-Rinderserum und von antitoxischem Rinderserum verzögert die Elimination des α-Toxins.

     
  4. 4.

    Nach doppelseitiger Nierenligatur wird markiertes Toxin erheblich langsamer aus der Blutbahn eliminiert; Ligatur beider Ureteren ist in dieser Hinsicht weniger effektiv.

     

Schlüsselwörter

Radioimmunassay Blutspiegel Staphylokokken-Toxin Festphase Antikörper 

Summary

  1. 1.

    A solid-phase radioimmunassay has been developed which utilizes antibodies covalently bound to cellulose. Its advantages and reaction conditions have been demonstrated with staphylococcal α-toxin.

     
  2. 2.

    Sera of some rabbits, human plasma and especially native antitoxic sera contain precipitating antibodies which bind added radioactive toxin in proportion to the concentration of native toxin (“inverse” radioimmunassay).

     
  3. 3.

    Native and labelled toxins disappear very quickly from the circulating blood of rabbits (half-life time below 5 min). After its disappearance from the blood, radioactive toxin cannot be redistributed into the circulation by injection of antitoxin. Previous injection of normal or antitoxic bovine serum delays the elimination of α-toxin.

     
  4. 4.

    Previous ligation of both kidneys delays the elimination of labelled toxin from the blood stream considerably. Ligation of the ureters is less effective in this respect.

     

Key-Words

Radioimmunassay Blood Level Staphylococcal Toxin Solid Phase Antibodies 

Preview

Unable to display preview. Download preview PDF.

Unable to display preview. Download preview PDF.

Literatur

  1. Arbuthnott, J. P., J. H. Freer, and A. W. Bernheimer: Physical states of staphylococcal α-toxin. J. Bact. 94, 1170–1177 (1967).PubMedGoogle Scholar
  2. Abndts, D.: Radioimmunologische Ultramikrobestimmungen von Proteinen und Polypeptiden: Entwicklung, Vergleich und Anwendungsmöglichkeiten. Inaug.-Dissertation, Gießen 1968.Google Scholar
  3. Catt, K., H. D. Niall, and G. W. Tregear: Solid phase radioimmunassay. Nature (Lond.) 213, 825–827 (1967).CrossRefGoogle Scholar
  4. Goscicka, T., W. Rudnicka, J. Goscicki, and B. Zablocki: Distribution of staphylococcus α-toxin in rabbit tissues investigated by the immunofluorescence method. Bull. Acad. pol. Sci. Cl. 2, 14, 603–606 (1966).Google Scholar
  5. Greenwood, F. C, W. M. Hunter, and J. S. Glover: The preparation of 131J-labelled human growth hormone of high specific radioactivity. Biochem. J. 89, 114–123 (1963).PubMedGoogle Scholar
  6. Habermann, E., K.-O. Räker u. D. Arndts: Radio-Retentionselektrophorese: ein quantitatives und spezifisches Verfahren zur Bestimmung einzelner Proteine im Nanogrammbereich. Klin. Wschr. 46, 46–47 (1968).PubMedCrossRefGoogle Scholar
  7. Israel, J., M. Oldstone, S. Levenson, E. D. Frank, and J. Fine: Mechanism of action of staphylococcal toxin in rabbits. Proc. Soc. exp. Biol. (N. Y.) 108, 709–711 (1961).CrossRefGoogle Scholar
  8. Nakamura, R. M., H. L. Spiegelberg, S. Lee, and W. O. Weigle: Relationship between molecular size and intra-and extravascular distribution of protein antigens. J. Immunol. 100, 376–383 (1968).PubMedGoogle Scholar
  9. Rapoport, M. I., L. F. Hodoval, and W. R. Beisel: Influence of Thorotrast blockade and acute renal artery ligation on disappearance of staphylococcal enterotoxin B from blood. J. Bact. 93, 779–783 (1967).PubMedGoogle Scholar
  10. — E. W. Grogan, V. McGann, and W. R. Beisel: The influence of specific antibody on the disappearance of staphylococcal enterotoxin B from blood. J. clin. Invest. 45, 1365–1372 (1966).PubMedCentralPubMedCrossRefGoogle Scholar
  11. Robbins, J. B., J. Haimovich, and M. Sela: Purification of antibodies with immunoadsorbents prepared using bromoacetyl cellulose. Immunochemistry 4, 11–22 (1967).PubMedCrossRefGoogle Scholar
  12. Schantz, E. J., W. G. Roessler, J. Wagman, L. Spero, D. A. Dunnery, and M. S. Bergdoll: Purification of staphylococcal enterotoxin B. Biochemistry 4, 1011–1016 (1965).PubMedCrossRefGoogle Scholar
  13. Wide, L., R. Axén, and J. Porath: Radioimmunosorbent assay for proteins. Chemical couplings of antibodies to insoluble dextran. Immunochemistry 4, 381–386 (1967).Google Scholar

Copyright information

© Springer-Verlag Berlin Heidelberg 1969

Authors and Affiliations

  • E. Habermann
    • 1
  • K. O. Räker
    • 1
  • G. Zeuner
    • 1
  1. 1.Pharmakologisches InstitutJustus Liebig-UniversitätGießenDeutschland

Personalised recommendations