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Überprüfung der Spezies und Reinheit von Zelllinien mittels Multiplex-PCR

Status: verabschiedet
METHODENSAMMLUNG DER BUND/LÄNDER-AG GENTECHNIK (LAG)
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Zweck und Anwendungsbereich

Im Rahmen der Überwachung von gentechnischen Arbeiten und Anlagen gemäß GenTG ergibt sich die Fragestellung, ob die Angaben des Betreibers bezüglich der Spezies von Zelllinien zutreffend sind und ob die verwendeten Zellkulturen frei von kontaminierenden, artfremden Organismen sind.

Zur Identifikation der Spezies einer Zelllinie und zum Aufdecken von potenziellen Kreuzkontaminationen durch artfremde Linien wird ein nach Ono et al. (2007) und Cooper et al. (2007) modifiziertes Multiplex-PCR basiertes Nachweisverfahren eingesetzt.

Durch die beiden Multiplex-PCR-Ansätze ist es möglich, insgesamt acht verschiedene Organismenarten nachzuweisen. Im Einzelnen lassen sich durch die
  • Multiplex-1-PCR Mensch, Maus, Ratte, Kaninchen und Schwein und mit der

  • Multiplex-2-PCR Afrikanische Grüne Meerkatze, syrischer Hamster und chinesischer Hamster

als Spezies der Zellkulturen identifizieren bzw. entsprechende Kreuzkontaminationen mit diesen Organismen feststellen.

Begriffe

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Literatur

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Copyright information

© Bundesamt für Verbraucherschutz und Lebensmittelsicherheit (BVL) 2011

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