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Untersuchungen über die Thermostabilität der aus Hühnerfibroblasten isolierten Ribonucleinsäuren

The thermal stability of ribonucleic acids from chick embryo fibroblasts

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Zusammenfassung

Aus intakten Hühnerfibroblasten können die cytoplasmatischen Ribonucleinsäuren durch Behandlung mit Phenol und Natriumlaurylsulfat bei 2° extrahiert werden. Werden die Nucleinsäuren auf 40° oder darüber hinaus erwärmt und rasch abgekühlt, so ändert sich die Struktur der 28S-Ribosomen-RNS derart, daß sie bereits bei etwa 26S sedmentiert, während die Sedimentationsgeschwindigkeiten der 18S-RNS und der 4S-RNS unverändert bleiben. Darüber hinaus scheint die 28S-RNS gegenüber Spaltung zu kleineren Molekülen besonders empfindlich zu sein; ein wenn auch geringerer Abbau findet selbst in Anwesenheit von Diäthyl-pyrocarbonat statt. Eine kleine Menge einer Ribonucleinsäure, die bei etwa 41S sedimentiert, wurde ebenfalls durch Phenol-Extraktion bei 2° freigesetzt. Diese RNS, die höchstwahrscheinlich mit der im Nucleolus befindlichen Stamm-RNS, aus der die 18S-und 28S-RNS hervorgehen, identisch ist, neigt ebenfalls stark zu Fragmentierung durch Erhitzen auf 40° und darüber hinaus.

Abstract

Cytoplasmic ribonucleic acids can be extracted from chick embryo cells with phenol and sodium dodecyl sulfate at 2°. If these ribonucleic acids are heated to 40° and above and chilled, the structure of the 28S ribosomal RNA is changed so that it sediments at about 26S. The 18S and 4S ribonucleic acids are not altered in sedimentation behaviour by heating and cooling. Moreover the 28S RNA is also more susceptible to breakdown to smaller molecules even in the presence of the ribonuclease inhibitor diethyl pyrocarbonate. A small amount of RNA sedimenting at about 41S, probably ribosomal precursor RNA, can also be extracted at 2°. It is also subject to change in sedimentation rate and to fragmentation when heated above 40°.

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Herrn Prof. Dr.Engelbert Broda zum 60. Geburtstag in freundschaftlicher Verehrung gewidmet.

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Sverak, L., Bonar, R.A. & Beard, J.W. Untersuchungen über die Thermostabilität der aus Hühnerfibroblasten isolierten Ribonucleinsäuren. Monatshefte für Chemie 101, 1483–1492 (1970). https://doi.org/10.1007/BF00911414

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